準確稱量：精確稱取瓊脂糖或聚丙烯酰胺等凝膠原料，以及緩沖液、添加劑等試劑，確保試劑用量準確，以保證凝膠的濃度和性能符合實驗要求。

檢查試劑質量：使用前檢查試劑的外觀、保質期等，如瓊脂糖應無結塊、變色等現(xiàn)象，避免使用變質或受污染的試劑，以免影響凝膠的凝固和電泳效果。

充分溶解：將瓊脂糖或聚丙烯酰胺加入到適量的緩沖液中，加熱攪拌使其充分溶解。加熱過程中要不斷攪拌，防止局部過熱導致試劑燒焦或溶液暴沸，確保凝膠溶液均勻一致。

避免過度加熱：溶解瓊脂糖時，加熱至溶液澄清透明即可，過度加熱可能會破壞瓊脂糖的結構，影響凝膠的凝固性能和分辨率。

添加添加劑：如需添加溴化乙錠（EB）等染色劑或其他添加劑，應在凝膠溶液冷卻至適當溫度后再加入，并充分混勻，避免因加入過早導致染色劑失效或因攪拌不勻造成染色不均。

清潔干燥：使用前將電泳槽和梳子等模具洗凈并擦干，避免殘留的雜質或水分影響凝膠的凝固和與模具的貼合度。

正確安裝：將模具組裝好，確保密封良好，防止凝膠溶液泄漏。對于一些可拆卸的模具，要注意各部件的安裝順序和緊密程度。

放置梳子：將梳子垂直插入模具的相應位置，確保梳子的齒與模具底部保持適當?shù)木嚯x，一般為 1 - 2 mm，以形成合適深度的加樣孔。同時，要保證梳子放置水平，避免加樣孔出現(xiàn)傾斜或大小不一的情況。

控制溫度：將冷卻至約 50 - 60℃的凝膠溶液緩慢倒入模具中。溫度過高可能會燙傷手指，且會使模具變形；溫度過低則凝膠可能在倒出前就開始凝固，導致灌注不均勻。

避免氣泡：傾倒凝膠溶液時，應沿著模具的一側緩慢倒入，盡量避免產(chǎn)生氣泡。如果有氣泡產(chǎn)生，可以用玻璃棒或移液器輕輕將其趕出，以免影響凝膠的質量和電泳結果。

一次灌注完成：盡量一次性將凝膠溶液灌注到模具中，避免多次添加導致凝膠分層或不均勻。如果需要制作較厚的凝膠，可以分多次灌注，但每次灌注的時間間隔不宜過長，以免先灌注的部分凝固。

自然冷卻：讓凝膠在室溫下自然冷卻凝固，不要人為加速冷卻過程，如放入冰箱或用風扇吹，否則可能導致凝膠收縮不均勻，產(chǎn)生應力，影響電泳時的分離效果。

避免震動：在凝膠凝固過程中，要保持模具靜止，避免震動或移動，以免破壞凝膠的結構，導致加樣孔變形或凝膠出現(xiàn)裂縫。

檢查凝固情況：一般凝膠在室溫下放置 30 - 60 分鐘即可凝固?？梢酝ㄟ^觀察凝膠表面是否平整、透明，以及用手指輕輕觸摸凝膠邊緣是否有粘性來判斷凝膠是否凝固。